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      內(nèi)皮細胞培養(yǎng)

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08
      內(nèi)皮細胞易于從大血管分離培養(yǎng)成單層細胞,對于研究內(nèi)皮細胞再生、腫瘤促血管生長因子(TAF)等有很大價值。
      研究人內(nèi)皮細胞培養(yǎng)以人臍帶靜脈灌流消化法最為簡便,其法如下:
      1、產(chǎn)后新鮮臍帶,無菌剪取10—15厘米長一段,如不能立即培養(yǎng),可于12小時內(nèi)保存于4℃。
      2、用三通注射器吸取溫PBS液注入臍靜脈中洗去殘血,在入口處用線繩扎緊,以防液體返流。
      3、用血管鉗夾緊臍帶一端,從另一端向臍靜脈中徐徐注入終濃度為0.1%的粗制膠原酶,充滿血管,消化3—10分鐘;注入口用線繩扎,以防液體返流。
      4、吸出含有內(nèi)皮細胞的消化液,于離心管中,注入溫PBS輕輕反復沖洗后,一并注入離心管中(此步驟可重復)。5、離心去上清,加入RPMI1640培養(yǎng)液制成細胞懸液,接種入培養(yǎng)器皿中,置溫箱培養(yǎng)。兩至三天可見細胞長成單層。
       

       

       
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