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      細(xì)胞周期的DNA檢測(cè)

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

      Ⅰ、樣品準(zhǔn)備 準(zhǔn)備以下一種或幾種樣品

      A、組織單細(xì)胞懸浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盤細(xì)胞)

      B、組織培養(yǎng)細(xì)胞

      C、Ficoll-hypaque分離的單核細(xì)胞

      Ⅱ、反應(yīng)體系-DNA低滲緩沖液

      檸檬酸三鈉     0.25g

      Triton-X 100 0.75ml

      Propidium iodide 0.025g

      核糖核酸酶      0.005g

      蒸餾水        250ml

      我們將該DNA低滲溶液于密閉瓶子中存放數(shù)月后并無(wú)發(fā)現(xiàn)有任何染色活性的丟失

      Ⅲ、染色

      1、 每一個(gè)管子中放入1×106個(gè)細(xì)胞;

      2、 樣品離心后盡可能完全地移去上清液,并且不要打碎沉淀塊;

      3、 入1ml的DNA低滲染色緩沖液至沉淀中,并混勻;

      4、 樣品于4℃下避光30分鐘或最長(zhǎng)不超過(guò)1個(gè)小時(shí)以備流式細(xì)胞儀分析。

      注意:延長(zhǎng)在低滲緩沖液的曝光時(shí)間會(huì)引起樣品碎片的增加。

       

       

       
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