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      常規(guī)組織傳代培養(yǎng)

      放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

      1. 吸除培養(yǎng)瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液。

      2. 向瓶內(nèi)加入胰蛋白酶和EDTA混合液少許,以能覆滿瓶底為限。

      3. 置溫箱中2~5分鐘,當(dāng)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)回縮,細(xì)胞間隙增大后,立即終止消化。

      4. 吸除消化液,向瓶內(nèi)注入Hanks液數(shù)毫升,輕輕轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶,把殘余消化液沖掉。注意加Hanks液沖洗細(xì)胞時,動作要輕,以免把已松動的細(xì)胞沖掉流失,如用胰蛋白酶液單獨(dú)消化,吸除胰蛋白酶液后,可不用Hanks液沖洗,直接加入培養(yǎng)液。

      5. 用吸管吸取營養(yǎng)液輕輕反復(fù)吹打瓶壁細(xì)胞,使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。

      6. 計數(shù)板計數(shù)后,把細(xì)胞懸液分成等份分裝入數(shù)個培養(yǎng)瓶中,置溫箱中培養(yǎng)。


       

       

       
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