一、細(xì)胞的基本形態(tài)觀察
(一)原理
細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能相關(guān)是很多細(xì)胞的共同特點(diǎn),在分化程度較高的細(xì)胞更為明顯,這種合理性是生物漫長(zhǎng)進(jìn)化過(guò)程所形成的。例如:具有收縮機(jī)能的肌細(xì)胞伸展為細(xì)長(zhǎng)形;具有感受刺激和傳導(dǎo)沖動(dòng)機(jī)能的神經(jīng)細(xì)胞有長(zhǎng)短不一的樹(shù)枝狀突起;游離的血細(xì)胞為圓形、橢圓形或圓餅形。
不論細(xì)胞的形狀如何,細(xì)胞的結(jié)構(gòu)一般分為三大部分:細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。但也有例外。例如:哺乳類(lèi)紅細(xì)胞成熟時(shí)細(xì)胞核消失。
(二)觀察方法與結(jié)果
1.制備蟾蜍脊髓壓片觀察脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞。
取蟾蜍一只,破壞腦和脊髓,在口裂處剪去頭部,除去延腦,剪開(kāi)椎管,可見(jiàn)乳白色脊髓,取下脊髓放在平皿內(nèi),用Ringer氏液洗去血液后放在載片上,剪碎。將另一載片壓在脊髓碎塊上,用力擠壓。將上面的載片取下即可得到壓片。在壓片上滴一滴甲苯胺蘭染液,染色10分鐘,蓋上蓋片,吸去多余染液。在顯微鏡下觀察,染色較深的小細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞。染成蘭紫色的、大的、有多個(gè)突起的細(xì)胞是脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞,胞體呈三角形或星形,中央有一個(gè)圓形細(xì)胞核,內(nèi)有一個(gè)核仁。
2.蟾蜍骨骼肌細(xì)胞的剝離與觀察
剪開(kāi)蟾蜍腿部皮膚,剪下一小塊肌肉,放在載片上,用鑷子和解剖針剝離肌肉塊成為肌束,繼續(xù)剝離,可得到很細(xì)的肌纖維(肌細(xì)胞)。盡可能拉直肌纖維。在顯微鏡下觀察,肌細(xì)胞為細(xì)長(zhǎng)形,可見(jiàn)折光不同的橫紋,每個(gè)肌細(xì)胞有多個(gè)核,分布于細(xì)胞的周邊(參照照片)。
3.蟾蜍肝臟壓片的制備與觀察
剪開(kāi)蟾蜍腹腔,取一小塊(約2~3mm3)肝放在平皿內(nèi),用Ringer氏液洗凈,用鑷子輕壓將肝中的血擠出。然后放在載片上,制片方法同脊髓壓片。染色用甲基蘭。顯微鏡下觀察可見(jiàn)肝細(xì)胞核染成蘭色,肝細(xì)胞緊密排列,擠成多角形。
4.蟾蜍血涂片的制備與觀察
取一滴蟾蜍血液,靠近一端滴在載片上.將另一載片的一端呈45°角緊貼在血滴的前緣,均勻用力向前推,使血液在載片上形成均勻的薄層。晾干。顯微鏡觀察可見(jiàn)蟾蜍紅細(xì)胞為橢球形,有核。白細(xì)胞數(shù)目少,為圓形。
5.人血涂片的制備與觀察
取人血一滴,制片方法同上。顯微鏡觀察可見(jiàn)人紅細(xì)胞為凹圓盤(pán)形,無(wú)核。自細(xì)胞數(shù)目少,為圓形。
6.人口腔上皮細(xì)胞標(biāo)本的制備與觀察
用牙簽刮取口腔上皮細(xì)胞均勻地涂在載片上(不可反復(fù)涂沫),滴一滴甲苯胺蘭染液,染色5分鐘,蓋上蓋片,吸去多余染液。顯微鏡下觀察可見(jiàn)復(fù)蓋口腔表面的上皮細(xì)胞為扁平橢圓形,中央有橢圓形核,染成蘭色。
二、測(cè)微尺的使用
(一)原理
測(cè)微尺分目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺,兩尺配合使用。目鏡測(cè)微尺是一個(gè)放在目鏡像平面上的玻璃圓片。圓片中央刻有一條直線,此線被分為若干格,每格代表的長(zhǎng)度隨不同物鏡的放大倍數(shù)而異。因此,用前必須測(cè)定。鏡臺(tái)測(cè)微尺是在一個(gè)載片中央封固的尺,長(zhǎng)1毫米(1000μm),被分為100格,每格長(zhǎng)度是10微米。
(二)方法
1.將鏡臺(tái)測(cè)微尺放在顯微鏡的載物臺(tái)上夾好,小心轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺和移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺使兩尺平行,記錄鏡臺(tái)測(cè)微尺若干格所對(duì)應(yīng)的目鏡測(cè)微尺的格數(shù)。
2.按下式求出目鏡測(cè)微尺每格代表的長(zhǎng)度
目鏡測(cè)微尺每格代表的長(zhǎng)度(μm)= X10
三、測(cè)量人口腔上皮細(xì)胞
從顯微鏡載物臺(tái)上取下鏡臺(tái)測(cè)微尺,換上人口腔上皮細(xì)胞標(biāo)本,測(cè)量細(xì)胞、細(xì)胞核的長(zhǎng)短徑。