淫羊藿為小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim、箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb. Et Zucc.) Maxim、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鮮淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分。2005版《中國藥典》一部收載的含量測定方法，一要是采用紫外分光度法測定總黃酮的含量，二是采用高效液相色譜法測定其淫羊藿苷的含量。有關淫羊藿及其制劑中淫羊藿苷的含量測定方法主要有高效液相色譜法、薄層掃描法等。

    一、高效液相色譜法

    2005版《中國藥典》淫羊藿含量測定項下：

    色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-水（30：70）為流動相；檢測波長為207nm。理論板數(shù)按淫羊藿苷峰計算應不得低于1500。

    供試品溶液的制備：取本品葉片粉末約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20m，稱定重量，超聲處理1小時，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

    文獻報道的HPLC法主要的流動相系統(tǒng)有：

    A：乙腈-水

    ①　Waters 515 高效液相色譜儀(Waters 公司)；Metachem Kromasil C18色譜柱(4.6mm×250mm,5μm)；流動相為乙腈-水(26：74)；檢測波長270nm；柱溫35℃。

    ②Angilen 1100 液相色譜儀；色譜柱Nova-pak250mm×4.6mm, 10μm)C18柱；乙腈-水(26：74)為流動相；檢測波長為270nm。

    ③HP1100型高效液相色譜儀(美國)；色譜柱為C18柱(4.6mm×250mm),大連依利特科學儀器有限公司提供；流動相：乙腈-水(30：70)；檢測波長270nm；柱溫室溫。

    ④島津LC-2010高效液相色譜儀；C18反相柱(150mm×4.6mm,島津公司)；柱溫40℃；流動相：乙腈-水(25：75)；檢測波長270nm。

    ⑤Agilent 1100 series 高效液相色譜儀；ApolloC18 ( 250×4.6mm,5μm)；流動相：乙腈-水(26：74)；柱溫室溫；檢測波長270nm。

    B：乙腈-磷酸溶液：

    ①Waters 高效液相色譜儀；YWG-C18柱(4.6mm×150mm,10μm ,北京分析儀器廠)；流動相乙腈-0.05%磷酸溶液(33：67)；檢測波長270nm；柱溫室溫。

    ②美國SSI PC2002 高效液相色譜儀；色譜柱Diamonsil C18 (4.6×250mm,5μm)；流動相為乙腈-水(用磷酸調pH值至3.0)(30：70)；柱溫35℃；檢測波長270nm。

    ③SP-1000高效液相色譜儀；色譜柱ODS-C18 (4.6mm×200mm, 5μm)；流動相0.075mol/L磷酸溶液-乙腈(用三乙醇胺調節(jié)pH值為6.6)(74：26)；檢測波長270nm；柱溫37℃。

    C：甲醇-醋酸溶液：

    ①日本島津SPD210A 高效液相色譜儀；ODS柱,10μm,250mm×4mm。流動相：甲醇-水-冰乙酸(60：40：0.5)；柱溫30℃；檢測波長270nm。

    ②P200 Ⅱ型高效液相色譜儀；色譜柱為Hypersil ODS2 (250mm×4.6mm,5μm,大連依利特科學儀器有限公司)；流動相為乙腈-0.4%醋酸水溶液(25：75)；檢測波長為270nm；柱溫為室溫。

    樣品溶液一般以甲醇、稀乙醇為提取溶劑，凈化處理一般用聚酰胺柱或C18小柱處理；也有用正丁醇-碳酸氫鈉、乙醚-醋酸乙酯等試劑萃取。

    另外，韓海建立復方骨寶片中有效成分淫羊藿苷含量的高效液相色譜測定法。采用Shimazdu 高效液相色譜儀；色譜柱Shimpack ODS (4.6mm×250mm, 5Lm)；流動相為乙腈-0.02 mol/L磷酸二氫鈉溶液(32：68)；檢測波長為254nm；柱溫30℃。

    二、薄層掃描法

    以薄層掃描法測定淫羊藿苷含量時，常用的薄層展開劑為醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水系統(tǒng)。如：胡潤淮等建立薄層掃描法測定復方仙靈脾注射液中淫羊藿苷含量的方法。采用CS-9301 型雙波長薄層掃描儀(島津)。薄層層析條件：硅膠GF254板；展開劑：醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)。薄層掃描條件：采用反射法單波長鋸齒掃描法，狹縫為1.2mm×1.2mm，線性參數(shù)SX =7，掃描寬度為14mm，測定波長為λs=272nm。供試品溶液的制備：用移液管吸取復方仙靈脾注射液5ml，置分液漏斗中，先用0.1mol/LNaOH飽和過的正丁醇萃取3次(10,15,20ml)，棄去堿液，合并正丁醇層，再用正丁醇飽和過的0.1mol/LNaOH溶液洗滌3 次(15,20,20ml)，棄去堿液，合并正丁醇層,置水浴上蒸干，殘渣以水7ml 溶解，置于已處理好的大孔吸附樹脂層析柱(1cm ×10cm) 上，依次用蒸餾水、20%乙醇、70%乙醇進行洗脫,洗脫液體積均為100ml ，流速為5ml/min。收集70%乙醇洗脫液，回收乙醇后，置于浴上蒸干，殘渣用少量甲醇溶解，移至5ml 容量瓶中，用甲醇定容至刻度。

    三、其它

    楊廣德等建立了薄層色譜-熒光分光光度法測定淫羊藿藥材中淫羊藿苷的含量。采用RF-540 型熒光分光光度計(日本島津)；硅膠G硅膠G加0.1mol/L Na2HPO4的羧甲基纖維素鈉溶液自制板；以醋酸丁酯-甲酸-水(1.3：1：1)在10℃以下放置后的上層溶液作為展開劑；顯色劑：10% AlCl3甲醇溶液；在Ex=430nm，Em =480nm條件下測定熒光強度。藥材用70%乙醇水浴回流提取。

    張明昶等采用一階導數(shù)光譜法測定骨松寶顆粒中淫藿苷類化合物的含量。采用UV-250IPC紫外可見分光光度計(日本島津)。樣品供試液制備方法：骨松寶顆粒→除去包裝→加入70%乙醇，60℃水浴中加熱提取→用60℃水超聲振蕩提取→靜置過夜→用70%乙醇補足重量→上取聚酰胺柱→先用30ml蒸餾水洗脫,棄去洗脫液→再用70%乙醇洗脫，收集乙醇液，定容于50ml 的容量瓶中，即為樣品供試液。在200～400nm范圍內自動掃描(△λ= 2nm)，以一階導數(shù)峰～谷法(262～276nm) 的振幅值(D)為定量依據(jù)測定含量。