高分子磁性微球是指通過適當?shù)姆椒ㄊ褂袡C高分子與無機磁性顆粒結合起來形成的具有一定磁性的高分子微球。高分子磁性微球在生物化學中有廣闊的應用前景。
一. 固定化酶
固定化酶是指利用物理吸附或化學結合法將自由酶固定到載體上,以提高酶的操作穩(wěn)定性和反復回收利用酶的技術。
游離酶在生物化學和生物醫(yī)用化學方面的應用往往不盡如人意, 而將酶固定在磁性載體上則有許多有點:可以提高酶的熱穩(wěn)定性、存放穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性; 改善酶的生物相容性、免疫活性、親疏水性;固定化酶從反應體系中分離和回收簡便,可重復使用,而且產(chǎn)物不受污染易于精制;若將多種酶結合在微球上還可進行多酶反應;可利用外部磁場控制磁性材料固定化酶的運動和方向,從而代替?zhèn)鹘y(tǒng)的機械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率;固定化酶再生性好, 使用效率高;可用于連續(xù)生產(chǎn),降低生產(chǎn)成本;可在外加磁場作用下快速分離,適于大規(guī)模連續(xù)化操作。
一般來說, 磁性載體的性質對固定化酶的應用十分重要, 它需滿足一定的條件:
1. 磁響應性要好;
2. 可與生物相容;
3. 能夠提供足夠大的表面積, 使酶反應順利進行, 降低反應基質和產(chǎn)物的分散限制;
4. 有一定的機械強度;
5. 具有再使用性;
6. 帶有反應性的功能基團。
高分子磁性微球作為固定化酶的載體,已顯示出優(yōu)異的吸附性能、良好的操作穩(wěn)定性及較高的固定效果等優(yōu)點,但由于酶在磁性高分子微球表面的纏結、取向等因素,其穩(wěn)定性和活性往往會降低。
Iman等人將磁性聚苯乙烯微球加入脲酶的磷酸緩沖液中,35℃下水浴攪拌150min,得到固定化酶,這種微球在外部磁場的作用下在流動反應器中可以不停地運動,磁性微球對弱磁場有較好的響應性,而且本身不會聚集。
二. 免疫分析及測定
免疫分析在現(xiàn)代生物分析技術中是一種重要的方法,它對蛋白質、抗原、抗體及細胞的定量分析發(fā)揮著巨大作用。磁性高分子微球用于免疫分析,其原理是在磁性高分子微球表面接枝定向吸附于細菌的抗體,并利用它與原液混合、沉降,在磁場作用下分離、提純,得到吸附于磁性高分子微球上的活細菌。磁性高分子微球可偶聯(lián)抗體分離帶特定抗原的免疫細胞,利用磁性高分子微球結合的抗原或抗體進行免疫分析,具有特異性高、分離快、重現(xiàn)性好等特點。
三. 生物化學合成
以磁性高分子微球為載體的固相有機合成技術,不僅可充分發(fā)揮固相合成的優(yōu)勢,而且在反應完成后,可迅速地將目標產(chǎn)物從剩余反應物、副產(chǎn)物及溶劑中方便地分離出來,且不影響產(chǎn)物的性質與純度。
一. 固定化酶
固定化酶是指利用物理吸附或化學結合法將自由酶固定到載體上,以提高酶的操作穩(wěn)定性和反復回收利用酶的技術。
游離酶在生物化學和生物醫(yī)用化學方面的應用往往不盡如人意, 而將酶固定在磁性載體上則有許多有點:可以提高酶的熱穩(wěn)定性、存放穩(wěn)定性和操作穩(wěn)定性; 改善酶的生物相容性、免疫活性、親疏水性;固定化酶從反應體系中分離和回收簡便,可重復使用,而且產(chǎn)物不受污染易于精制;若將多種酶結合在微球上還可進行多酶反應;可利用外部磁場控制磁性材料固定化酶的運動和方向,從而代替?zhèn)鹘y(tǒng)的機械攪拌方式,提高固定化酶的催化效率;固定化酶再生性好, 使用效率高;可用于連續(xù)生產(chǎn),降低生產(chǎn)成本;可在外加磁場作用下快速分離,適于大規(guī)模連續(xù)化操作。
一般來說, 磁性載體的性質對固定化酶的應用十分重要, 它需滿足一定的條件:
1. 磁響應性要好;
2. 可與生物相容;
3. 能夠提供足夠大的表面積, 使酶反應順利進行, 降低反應基質和產(chǎn)物的分散限制;
4. 有一定的機械強度;
5. 具有再使用性;
6. 帶有反應性的功能基團。
高分子磁性微球作為固定化酶的載體,已顯示出優(yōu)異的吸附性能、良好的操作穩(wěn)定性及較高的固定效果等優(yōu)點,但由于酶在磁性高分子微球表面的纏結、取向等因素,其穩(wěn)定性和活性往往會降低。
Iman等人將磁性聚苯乙烯微球加入脲酶的磷酸緩沖液中,35℃下水浴攪拌150min,得到固定化酶,這種微球在外部磁場的作用下在流動反應器中可以不停地運動,磁性微球對弱磁場有較好的響應性,而且本身不會聚集。
二. 免疫分析及測定
免疫分析在現(xiàn)代生物分析技術中是一種重要的方法,它對蛋白質、抗原、抗體及細胞的定量分析發(fā)揮著巨大作用。磁性高分子微球用于免疫分析,其原理是在磁性高分子微球表面接枝定向吸附于細菌的抗體,并利用它與原液混合、沉降,在磁場作用下分離、提純,得到吸附于磁性高分子微球上的活細菌。磁性高分子微球可偶聯(lián)抗體分離帶特定抗原的免疫細胞,利用磁性高分子微球結合的抗原或抗體進行免疫分析,具有特異性高、分離快、重現(xiàn)性好等特點。
三. 生物化學合成
以磁性高分子微球為載體的固相有機合成技術,不僅可充分發(fā)揮固相合成的優(yōu)勢,而且在反應完成后,可迅速地將目標產(chǎn)物從剩余反應物、副產(chǎn)物及溶劑中方便地分離出來,且不影響產(chǎn)物的性質與純度。