1.原理

樣品中的一氧化碳在酸性介質(zhì)中定量釋放，達(dá)到平衡時(shí)，用頂空進(jìn)樣器取液上氣體注入氣相色譜儀中，通過(guò)甲烷轉(zhuǎn)化器，轉(zhuǎn)化為甲烷，用火焰離子化監(jiān)測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。

2試劑和材料

2.1除另有規(guī)定外，所有試劑均為分析純，水為蒸餾水；

2.2標(biāo)準(zhǔn)一氧化碳?xì)怏w：純度大于99.9％；

2.3硫酸：20％(V/V);

2.4 Ⅰ-辛醇；

2.5空氣：純度大于99.9％。

3主要儀器和設(shè)備

3.1氣相色譜儀并配有甲烷轉(zhuǎn)化器；島津GC14C

3.2均質(zhì)器；

3.3離心機(jī)(4000rpm)；

3.4氣密性進(jìn)樣器：10µL、50µL、1mL；

3.5頂空進(jìn)樣器中興公司DK3001：

頂空瓶100 mL。

4測(cè)定步驟

4.1校正曲線的繪制

4.1.1 CO氣體濃度系列的配制

4.1.1.1將純度99.9％的CO氣體在常壓下充入100 mL的頂空瓶中，及時(shí)密封；

4.1.1.2常壓下，同樣取純空氣6份于100 mL的頂空瓶中，及時(shí)密封；

4.1.1.3在裝滿純空氣的100 mL的頂空瓶中，分別用氣密性mL進(jìn)樣器注入99.9％CO 10µL、50µL、100µL、200µL、300µL、500µL，配成濃度分別為0.1µL/ mL 、0.5µL/ mL 、1.0µL/ mL 、2.0µL/ mL 、3.0µL/ mL 、5.0µL/ mL的標(biāo)準(zhǔn)CO氣體系列。

4.1.2校正曲線的配制

4.1.2.1在6個(gè)100 mL頂空瓶中，先后加入55 mL的蒸餾水、0.25 mL的Ⅰ-辛醇、20 mL的20％硫酸蓋緊。抽出1 mL瓶中的液上空氣，再分別打入1 mL不同濃度的CO氣體(A.4.1.1.3)；

4.1.2.2劇烈振搖混合1min后，靜置1h;

4.1.2.3頂空進(jìn)樣器，抽取頂空瓶?jī)?nèi)液體上方氣體1.0 mL，進(jìn)行氣相色譜測(cè)定；

4.1.2.4根據(jù)儀器響應(yīng)值峰面積與氣體中CO濃度關(guān)系，得到校正曲線。

4.2對(duì)真空包裝內(nèi)氣體的檢測(cè)

用氣密性進(jìn)樣針將1.5 mL空氣打入真空包裝中，靜置15min后，抽取1 mL氣體，進(jìn)樣，根據(jù)下列所述色譜條件，進(jìn)行檢測(cè)。

4.3樣品檢驗(yàn)

4.3.1稱取兩份各100g樣品(精確到0.1g，去除內(nèi)臟、骨和皮)，一份為即測(cè)樣品，另一份為對(duì)照樣品，袋口微敞，置于4℃冰箱內(nèi)，兩天后待測(cè)；

4.3.2將即測(cè)樣品切碎后，加200 mL蒸餾水，在冰浴下均質(zhì)1min，作為試驗(yàn)液；

4.3.3將試驗(yàn)液于4000rpm(10℃)離心10min后，吸取上清夜50mL于100mL頂空瓶中，迅速加入5mL蒸餾水，20mL20％的硫酸，1.25mL Ⅰ-辛醇后密封，劇烈混合約2min，靜置1h。用頂空進(jìn)樣器抽取頂空瓶?jī)?nèi)液體上方氣體1 mL，進(jìn)行氣相色譜測(cè)定。

4.4CO含量變化趨勢(shì)的檢測(cè)

4.4.1放置兩天的對(duì)照樣品檢測(cè)，步驟同A.4.3.2和A.4.3.3；

4.4.2將兩次檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比。

4.5色譜分析

4.5.1氣相色譜條件

a)色譜柱：CarbonxenTM1006PLOT,30m×50µm i.d.,或相當(dāng)者；

b)檢測(cè)器：氫火焰離子檢測(cè)器(FID)；

c)色譜柱溫度：50℃；

d)進(jìn)樣口溫度：100℃；

e)檢測(cè)器溫度：200℃；

f)鎳轉(zhuǎn)化爐溫度：375℃；

g)氣體流速：氮?dú)?高純氮，純度≥99.99％)，15mL/min；

h)進(jìn)樣方式：DK3001頂空進(jìn)樣；

i)進(jìn)樣量：1 mL。

4.5.2氣相色譜測(cè)定

根據(jù)校正曲線，進(jìn)行定量。在上述色譜條件下。CO的保留時(shí)間約為1.195 min，標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖參見(jiàn)附錄A中圖A1。

每個(gè)樣品做2個(gè)平行樣，結(jié)果以算術(shù)平均值計(jì)。

A5計(jì)算

按式(1)計(jì)算樣品中CO的殘留量。 

X＝1.165×A× V/v ×1/16.67×1000…… …… …… (1)

式中：

X—— 一氧化碳(CO)殘留量

A—— 試樣中測(cè)得的色譜峰面積在校正曲線上所對(duì)應(yīng)的CO含量，µL；

V—— 頂空瓶中氣相體積，mL；

v—— 氣相色譜進(jìn)樣量，mL；                                                                                      

1.165—— 1moLCO氣體在常壓、20℃時(shí)的氣體密度，mg/mL；

16.67—— 每取出50ml的肌漿上清夜中所對(duì)于樣品的質(zhì)量，g。

6.檢出限

本方法檢出限(LOQ)為20µg/kg。